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ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,裸鼠ELISA試劑盒,倉鼠ELISA試劑盒,標準品,培養(yǎng)基和生物試劑等

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ELISA試劑盒

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人ELISA試劑盒

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抗體

標準品

Sigma試劑

Amresco試劑

食品檢測試劑盒

Spectrum試劑

免疫化學(xué)產(chǎn)品

其他方法測試盒

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人瘦素ELISA試劑盒

人瘦素ELISA試劑盒
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價格:電議

型號:人LEP

采購度:789    原產(chǎn)地:美洲

發(fā)布時間:2011/12/22 14:12:01

產(chǎn)品簡介:“人瘦素ELISA試劑盒” 用于定量測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中該試劑的含量。

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詳細信息

     人瘦素(LEP)試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:                                                          96T
0.3μg/L -12μg/L
 
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中瘦素(LEP含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人瘦素(LEP水平。用純化的人瘦素(LEP抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入瘦素(LEP),再與HRP標記的瘦素(LEP抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的瘦素(LEP呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人瘦素(LEP濃度。
試劑盒組成

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標試劑
6ml×1瓶
8
標準品(24μg/L)
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
9
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張 
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個

標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

12μg/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/L
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/L
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/L
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
0.75μg/L
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 
 
2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及期
1.試劑盒保存:;2-8。
2.期:6個月
 

更新時間:2024/12/9 9:52:18

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