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閱讀次數(shù):1023 發(fā)布時(shí)間:2022/5/11 10:39:34
1. 規(guī)范加樣:不規(guī)范的移液操作可能帶來0.1%到5%的移液誤差,甚至更高!
a. 移液器定期校準(zhǔn):選擇密封性好質(zhì)量可靠的吸頭,吸量不準(zhǔn)確,直接影響檢測結(jié)果;
b. 加樣,溶液充分混勻,垂直懸空加入液體,避免加在孔壁上,不可產(chǎn)生氣泡;
c. 加樣時(shí)避免液體濺出,如有樣本濺出,應(yīng)用吸水紙輕輕拭干,并做相應(yīng)記錄;
d. 如果加樣槍漏氣以至于加樣的量不夠,不能用槍吸出再加,做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn);
e. 每次加樣順序一致,尤其底物、終止液順序一致,保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品的溶解與稀釋,嚴(yán)格按說明書要求進(jìn)行。
a. 粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。
b. 根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水(或說明書指定溶液),加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解10-30分鐘,讓粉末完全溶解。
注意:加水(或說明書指定溶液)后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待完全溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。
3.假陽性結(jié)果和假陰性結(jié)果
a、標(biāo)本的采集與保存
當(dāng)標(biāo)本采集保存不當(dāng)產(chǎn)生溶血時(shí),紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì),其通過吸附或“PP效應(yīng)”(蛋白質(zhì)間相互吸附的現(xiàn)象)結(jié)合后,可催化A、B液顯色而造成假陽性
b、標(biāo)本采集保存不當(dāng)致細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,會產(chǎn)生假陽性反應(yīng);標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG聚合,易使間接法的試驗(yàn)本底加深。因此,標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。
c、反復(fù)凍融血清會使抗體效價(jià)跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存做多次檢測,宜少量分裝凍存。
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