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ELISA實(shí)驗(yàn)之十八條通用法則

點(diǎn)擊次數(shù):12591   發(fā)布時(shí)間:2022/5/7 11:03:10

 ELISA實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的,無(wú)論是對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求,都是如此。小編給大家總結(jié)了一些在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)所要注意的一些問(wèn)題,一起來(lái)看下吧!
 
    1.移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%�?捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。有業(yè)人員進(jìn)行矯正。
 
    2.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
 
    3.要在實(shí)驗(yàn)1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
 
    4.實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
 
    5.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
 
    6.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
 
    7.將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
 
    8.液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
 
    9.溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
 
    10.洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
 
    11.洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可保存。
 
    12.底物是光敏感的,要在臨用現(xiàn)配。
 
    13.檢測(cè),要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
 
    14.底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
 
    15.待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果。
 
    16.溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
 
    17.應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
 
    18.對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
 
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