血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。胎牛血清是血清中的一種,是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。胎牛血清是品質(zhì)的,因?yàn)樘ヅ_未接觸外界,血清中所含的
抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分*少。
胎牛血清的主要作用
1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
胎牛血清的選擇
1.顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高度對(duì)血清并無直接影響,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程中嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂。
總的來說,國產(chǎn)的血清總呈現(xiàn)出蠟黃,進(jìn)口的血清質(zhì)量的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色。當(dāng)然熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎诩t蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。
2.沉淀
很多血清客戶,會(huì)發(fā)現(xiàn)
進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。
血清中的沉淀是由纖維蛋白凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)經(jīng)過多次凍融,就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。
進(jìn)口的胎牛血清過濾分裝前很少會(huì)反復(fù)凍融,生產(chǎn)后的成品也是清澈的,但隨著時(shí)間的推移,血清中大量纖維蛋白會(huì)析出形成沉淀,當(dāng)然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛年齡在2周左右,血清中的各種大量纖維蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會(huì)渾濁,甚至有大量沉淀。
當(dāng)然,購買回來的血清都是冷凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢融化,否則沉淀相對(duì)較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對(duì)細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3.澄清度
進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,標(biāo)簽為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深,對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對(duì)比,可容易分辨。