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推薦:ELISA試劑盒加液注意事項

點擊次數:12503   發(fā)布時間:2022/12/5 10:42:27

酶聯免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,簡寫ELISA或ELASA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。
 
ELISA試劑盒在科研域應用廣泛,靈敏度高和特異性強的特點更是家喻戶曉。那我們在實驗中,如遇到試劑盒需要加液,那加液的過程中是不是也有我們應該注意的地方呢?恒遠生物給大家?guī)碛嘘P“ELISA試劑盒加液注意事項”的解答,下面請看具體講解。
 
在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。 加標本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
 
作為ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
 
ELISA試劑盒血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深。一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。
 
如果您有其他實驗上的問題,歡迎來聯系我司,為您提供業(yè)的一對一技術指導。上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實驗室,備有業(yè)的技術研發(fā)團隊,ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售,實驗提供免費代測服務,并提供精湛的技術服務,歡迎來電咨詢!

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