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表達(dá)β-半乳糖苷酶噬菌體的噬菌斑分析

點(diǎn)擊次數(shù):13344   發(fā)布時(shí)間:2012/8/30 10:44:51

上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)家elisa試劑盒經(jīng)銷商,和國(guó)內(nèi)眾多的大型企業(yè)合作,也是是這個(gè)市場(chǎng)的領(lǐng)頭羊,為了回饋客戶,迎接中秋和國(guó)慶的到來(lái)從即日起全場(chǎng)產(chǎn)品一律8折出售,歡迎各位顧客前來(lái)咨詢和購(gòu)買,(elisa試劑盒。生物試劑,血清,培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)品

材料:

LB或NZCYM頂層瓊脂或瓊脂糖,含有X-gal

對(duì)于3ml頂層瓊脂,加40ul 2%X-gal。X-gal要在臨用前才加入已冷卻的頂層瓊脂(47℃)中。

大腸桿菌鋪平板細(xì)菌

只有不是β-半乳糖苷酶的過(guò)量表達(dá)株,可采用任何支持特異性λ噬菌體裂解生長(zhǎng)的大腸桿菌。細(xì)菌染色體上單拷貝lacZ基因的存在不影響噬菌斑的檢測(cè)。

方法:

1.      將λ噬菌體原種于SM+明膠液稀釋。

2.      用10ul適當(dāng)稀釋的λ噬菌體感染0.1ml鋪平板細(xì)菌。感染培養(yǎng)物37℃溫育20min。

3.      用3ml含X-gal的已熔頂層瓊脂(47℃)至個(gè)試管,通過(guò)輕拍或輕微渦旋振蕩混勻,隨后倒入至瓊脂平板上。

4.      用剩下的噬菌體原種的稀釋液重復(fù)步驟3.

5.      當(dāng)頂層瓊脂凝固后,將平板于37℃倒置培養(yǎng)15-18h。

6.      將平板哦成那個(gè)37℃培養(yǎng)箱中取出,再于室溫下放置2h,然后記錄噬菌斑的顏色。
 

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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